紫外光谱测试过程中遇到一些小问题,请教大家一下!!(UV)
如何选择
紫外可见分光光度计的双波长最近用紫外可见分光光度计同时测量三种物质的含量,打算采用双波长法测定,三种物质的标准曲线均已测得,请问如何用计算机筛选最佳波长对?有专门的软件吗?这三种物质的标准曲线分别为Y1=.0075+.0001.Y2=.006X+.00008.Y3=.0066X+.0001.麻烦大家指点一下,谢谢
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1、三个物质的光谱基本重在一起,也可以用等吸光点法来选择波长,但需要用解方程方法来求解三个物质的浓度(只有两个物质时可以用等吸光点法来扣除另一物质及背景干扰,用差量法计算,有三个及以上物质时,至少有一种物质可以用单波长法来测定才方便用等吸光点法来差量法测定。)...
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1、三个物质的光谱基本重在一起,也可以用等吸光点法来选择波长,但需要用解方程方法来求解三个物质的浓度(只有两个物质时可以用等吸光点法来扣除另一物质及背景干扰,用差量法计算,有三个及以上物质时,至少有一种物质可以用单波长法来测定才方便用等吸光点法来差量法测定。)2、你应该扫描出200-300nm波段的曲线,我看A1和21曲线还在升呀(11应该没有吸收了),应该还有吸收峰,你扫出来后看看,说不定可以直接用等吸光点-双波长法测定,不必解方程的。3、在定量测定时,浓度应该控制高一些,保持总A在0.2-0.8之间,这样可以控制测定误差不要大。4、你给出了A1、11、21的标准曲线,X与Y是如何对应吸光度A和浓度C的?我需要判断你的公式中的截距在通常情况下是否可省略,如果截距值相对于含X项的值不能省略,那么你做三元线性方程组求解时,就不能直接用教科书上给出的公式,需要略作推导,因为有三个常数项要参加计算。 还有一点要说明:测定的波长不同,同一物质的标准曲线方程也不同。因为波长变了,摩尔吸光系数也改变了,标准曲线的斜率、截距也随之变化。所以,用解方程法求解时,指定三个波长来测定,标准曲线方程的截距就不一定是你给出的了,需要重新测定。 三个以上的物质浓度测定如果不作掩蔽、分离处理,数学处理过程会略为复杂一些。 关于波长的选择及其他问题,我已经发邮件到你信箱,请查收。
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从理论上讲,三种物质或者更多种物质都是可以测试的,但是就比较复杂,误差也会大很多的,对于两种物质的测试比较常见。