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SEC色谱柱柱效检查所用试剂如何选择(LC)
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仪器分析
SEC色谱柱柱效检查所用试剂如何选择(LC)
在色谱排阻法中,请问对
色谱柱
进行柱效检查时,如何选用试剂?我们现在用的是2mg/ml的BSA,但感觉BSA主峰前面还有许多小峰,希望换一个更纯的物质来做柱效检查,但我这方面了解得不多,不知道当初建立方法时是出于我们要检测的样品是
蛋
白类物质才选择了BSA还是仅仅只是随机地选了一个物质,希望各位高手能给我一些指点。谢谢了!(色谱柱的说明书中倒有给出他们做柱效检查的物质,看他们测出的柱效能大于20000,而我们用BSA检测,柱效基本就10000~11000。)
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心动
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2019-08-11
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柚子
,食品检测工程师
2019-08-12回答
如果计算柱效应该是用:对氨基苯甲酸。如果要看分离度,以及各区段蛋白的对称性,就要用多个蛋白的混合物,最好用说明书~检测报告中的样品~混合物,包括蛋白和对氨基苯甲酸。如果用白蛋白测定柱效,除非你测定的蛋白也是白蛋白,否则就没有必要了。无论是看柱效,还是分离度,或者对称性,乃至重复性。因为对你的检测指导意义不大。最好用说明书的方法,或者用你的检测物质去计算,无论是柱效,还是其它指标。白蛋白的凝胶纯度,正常应该是有多个分子量的,不仅有二聚体,还有三聚体,以及多聚体,只要上样量足够了,你就能看到。
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