我还想再问一下，过柱应该也可以逐渐改变洗脱剂极性梯度淋洗吧？那么什么时候考虑加大洗脱剂极性呢？

20毫升就差不多了，花了，是你装的柱子不均匀，有紧有松造成的。上样时不平也会有那样的情况发生。通过薄层调节流动相的极性，柱长加长，固定相的粒度变小，利用储液瓶加压的办法就有可能分开了。

开裂是因为,两种不同溶胀比的溶剂经过柱子

湿法填柱的话，填完后加溶剂再走一段时间，然后将柱子密封放置过夜（至少也应当放置1小时以上）让硅胶完全沉降且均匀浸润，空气也可以完全排出。这样你的柱子分离效果会好一些，而且不容易开裂。如果你使用了低沸点溶剂，例如二氯甲烷、乙醚等，在现在的天气情况下挥发的比较严重，柱子更容易裂。