4．常用生物指示剂(1)湿热灭菌法 湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus，如NCTC 10 007、NCIMB8157、ATCC7953)。D 值为1.5～3.0min，每片(或每瓶)活孢子数5×105～5×106 个，在121℃、19min 下应被完全杀灭。此外，还可使用生孢梭菌孢子（Spores ofClostridium sporogenes 如NCTC 8594、NCIMB 8053、ATCC 7955)，D 值为0.4～0.8min。(2)干热灭菌法 干热灭菌法最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus subtilis，如NCIMB 8058、ATCC 9372)。D 值大于1.5min，每片活孢子数5 × 105 ～ 5 × 106 个。去热原验证时使用大肠埃希菌内毒素（Escherichia coil endoxin），加量不小于1000 细菌内毒素单位。(3)辐射灭菌法 辐射灭菌法最常用的生物指示剂为短小芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus pumilus，如NCTC l0 327、NCIMBl0 692、ATCC 27142)。每片活孢子数107～108，置于放射剂量25kGy 条件下，D 值约3kGy。但应注意灭菌产品中所负载的微生物可能比短小芽孢杆菌孢子显示更强的抗辐射力。因此短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程，但不能用于灭菌辐射剂量建立的依据。(4)气体灭菌法 环氧乙烷灭菌最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus subtilis，如NCTC 10 073、ATCC 9372)。气态过氧化氢灭菌最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillusstearothermophilus，如NCTCl0 007、NCIMB 8157、ATCC 7953)。每片活孢子数1×106～5×106 个。环氧乙烷灭菌中，枯草芽孢杆菌孢子D 值大于2.5min，在环氧乙烷浓度为600mg／L，相对湿度为60％，温度为54℃下灭菌，60min 应被杀灭。(5) 过滤除菌法 过滤除菌法最常用的生物指示剂为缺陷假单胞菌(Pseudomonas diminuta,如ATCCl9 146)，用于滤膜孔径为0.22μm 的滤器；黏质沙雷菌(Serratin marcescens)(ATCCl4 756)，用于滤膜孔径为0.45μm 的滤器。