我用80%乙醇得到黄酮提取液，现在需要进行纯化，选用的HPD100非极性树脂，2.6*50cm的柱子。因为第一次接触纯化，没人指导，所有不清楚怎么操作，我看了些资料，想问问大家我理解的对不对。首先把新买的树脂进行预处理：95%乙醇泡24h，用乙醇洗至洗脱液和水混合不浑浊，再用水洗至无醇味。然后用5%盐酸洗，水洗至中性，5%氢氧化钠洗，水洗至中性。（有的文献中没有后面的酸洗和碱洗，请问这个步骤的意义是什么呢？可以省略吗？）湿法装柱和上样：往柱子里塞一块棉花，用水打湿。 把溶在水里的树脂倒进柱子，敲打柱子，等树脂沉淀后，打开活塞放水，直到距离树脂面1cm关闭活塞。（这一步骤有2个疑问：1.装柱量2/3是指放完水后的树脂占柱子的2/3吗？ 2.有的是留1cm高的水，有的是不留，有的还要放一片滤纸，这个应该怎么弄呢？） 按照计算的最大上样量，把提取液倒入柱子内，等液面下降至与树脂快平齐的时候，加入洗脱剂，收集洗脱液。（1.最大上样量是不是就是，洗脱液中黄酮浓度几乎等于进样浓度时的体积？2. 加入洗脱剂的时间，是在提取液的液面下降至与树脂快平齐的时候吗？）因为我的样品是用乙醇提的，我看许多文献都是把提取液冻干，再用蒸馏水溶解上样，还有的说提取液要无醇。我们实验室没有冻干机，所以想请问一下，我直接把提取液上样可以吗？为什么不能有醇呢？麻烦大神解答一下，感谢！