毁忆演绎传说,食品安全专员
2018-10-25回答
1. 我测的天然色素是“花青苷色素”含量。2.用的方法是:NY/T832--2004中附录A(规范性附录) 黑米色素检验方法 3.其他色素的测定我没有测过“胡萝卜素的高效液相色谱法定量测定”以供参考:1.适用范围本方法几乎适用于所有的食品中胡萝卜素的测定。2.主要试剂和仪器2.1.主要试剂胡萝卜素:高效液相色谱用胡萝卜素;胡萝卜素标准原液:20mg的胡萝卜素用环己烷溶解并定容100mL,作为标准;原液:取2mL该标准原液,用环己烷定容100mL,测定455nm的吸光度。利用胡萝卜素的摩尔吸光系数(ε=131500)和分子量(536.88)求出胡萝卜素的浓度;胡萝卜素标准原液浓度(μg/ mL)=(E×536.8×20×1000)/131500;E:稀释溶液的455nm处的吸光度(参比:环己烷)无醛乙醇:在1L乙醇中加入5mL50%的KOH溶液及5gZn粉进行2h的回流后蒸馏之。除去初馏液和后馏液各10%。也可使用市售的优级纯的试剂。胡萝卜素标准溶液:将胡萝卜素标准原液用无醛乙醇分别稀释为如下浓度的溶液作为标准溶液:1,2,5,10,20mg/mL。2.2.仪器离心管:50mL褐色具塞离心管;烧瓶:50mL褐色梨型;高效液相色谱仪:带有紫外-可见检测器。3.过程简述3.1.试验溶液的调制:准确称取相当于(0.01~0.4)mg胡萝卜素的试料(W1g)于离心管中,加入7.5mL3%的邻苯三酚乙醇溶液,充分搅拌后,加入0.75mL60%KOH溶液和约1.4gKOH颗粒,用玻璃棒搅拌的同时,在56℃的水浴中进行20min碱化。冷却后,加入1%NaCl溶液17mL,异丙醇1.5mL,醋酸乙酯:正己烷(1:9)11mL,振荡10min,离心[1300×g(3000 rpm),10min]后上层液移置于烧瓶中。水层用醋酸乙酯:正己烷(1:9)11mL以同样方法萃取2次。只是振荡时间为5min。合并萃取液,在35℃条件下进行减压蒸馏,其残留物中加入环己烷: 无醛乙醇(1:3)溶解,使胡萝卜素浓度约为(2~20)μg/ mL作为试验溶液(V1mL)。另外再准确称取一份试料(W2g),在试料中加入含相同量(Aμg)胡萝卜素的标准原液,进行前述同样的操作,作为标准添加试验溶液(V2mL)。3.2.高效液相色谱条件:色谱柱:ODS(4.6mmi.d×150mm)柱温:25℃移动相:三氯甲烷:甲醇(4:96),含有50μg/ mL抗坏血酸软脂酸酯。流速:1.0mL/min检测器:紫外-可见检测器(455nm)3.3.定量:试验溶液及标准添加溶液各20μL(υ1,υ2μL)注入色谱柱中,测得胡萝卜素的峰面积。3.4.制作标准工作曲线:? ?? ???将胡萝卜素标准溶液1,2,5,10,20mg/mL分别取20μL注入色谱柱中,测得各溶液的峰面积,以浓度对峰面积作标准工作曲线。4.结果计算首先通过标准曲线求出20μL(υ1,υ2μL)试验溶液和标准添加溶液中胡萝卜素的含量(s1,s2 ng),进而求出试料中胡萝卜素的含量(S1,S2 μg),利用下式计算试料中胡萝卜素的含量(μg)= [S1(μg)]/ [S2(μg)- S1(μg)] ×A(μg)×100/W1(g)S1(μg)= s1( ng) ×[V1(mL)/ υ1(μL) ]×W2(g)/ W1(g)S1(μg)= s1( ng) ×[V2(mL)/ υ2(μL) ]5.来源:《卫生试验法注解》2000版日本药学会编