主题：【第三届原创参赛】凯氏（Kjeldahl）定氮法之经验总结

凯氏定氮方法得到的结果是总氮，导致了三聚氰胺的大量使用，呵呵！

支持实际工作的经验交流，谢谢！

总结的非常全面啊

三、讨论凯氏定氮法作为目前法定的国标方法与我们的工作密不可分，本文主要通过综述凯氏定氮法操作的细节及注意事项，为关注此检测方法的从业人员提供一定的帮助，从而有效的提高效率。主要参考文献[1]GB 5009.5-2010 食品中蛋白质的测定 中国标准出版社，2010.3.26[2]寇云娟，谭源，韩起文. 牛奶中蛋白质的测定原理及其注意事项 2006，7.[3]蛋白质测定实验研究[J]实验室研究与探讨，2005, 24(4): 58-59

学习啦，我们有时也用这个

4）如硫酸缺少，过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用。因此，当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量；加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点；催化剂硫酸铜在有机物全部消化后，溶液显清澈透明的蓝绿色，可用它来指示消化终点。此外，硫酸铜还可用做下一步蒸馏时碱性反应的指示剂。? 过氧化氢，为氧化剂，有助于有机物消化，同时可以消除消化过程中的气泡现象。（5）向蒸馏瓶中加入浓碱时，往往出现褐色沉淀物，这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应，生成氢氧化铜，经加热后又分解生成氧化铜的沉淀。有时铜离子与氨作用，生成深兰色的结合物[Cu(NH3)4]2+ ， 加入氢氧化钠是否足量,常常影响整个测定的顺利进行。由反应原理可知，当氢氧化钠足量时有黑色氧化铜生成而使溶液呈淡黑色；当氢氧化钠量不足时就无黑色氧化铜产生而使溶液呈淡蓝色，所以有无氧化铜颜色存在是判断氢氧化钠是否足量的标志。（6）因蒸馏时反应室的压力大于大气压力，故可将氨带出。所以，蒸馏时，蒸气要发生均匀，充足，蒸馏中不得停火断气，否则，会发生倒吸。停止蒸馏时，由于反应室外层的压力突然降低，可使液体倒吸入反应室外层，所以，操作时，应先将冷凝管下端提高液面并清洗管口，再蒸一分钟后关掉热源。蒸馏是否完全，可用精密ＰＨ试纸测冷凝管口的冷凝液来测定，中性则说明已蒸馏完全。一般情况下建议使用半微量法，因为如果蒸馏失败的话，半微量法还可继续蒸馏，而常量法只好全部重来，费时费力。我们使用海能K9840经过多次蒸馏吸收实验达到理想效果。（7）混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。（8）吸收液也可以用0.01当量的酸代表硼酸，过剩的酸液用0.01N碱液滴定，而以硼酸为氨的吸收液，可省去标定碱液的操作，且硼酸的体积要求并不严格，亦可免去用移液管，操作比较简便。另外，硼酸吸收液的温度不应超过40℃，否则氨吸收减弱，造成检测结果偏低。可把接收瓶置于冷水浴中。（9）在盐酸标准溶液的配制时，必须将基准无水碳酸钠于270-300℃灼烧至恒重后称取所须用量，否则也会影响蛋白质测定结果的准确性。盐酸标准溶液的浓度，常量法中取0.1M比较合适，半微量法中则在0.02～0.05M之间比较合适。

LZ总结得挺不错的

分析方法里最不喜欢的就是凯氏定氮法！它首先默认一些东西，所以给造假制造很大空间。实在没有方法了最后再考虑的方法！奶粉中的三聚氰胺，实在是应该废弃。该死的国标！

还想请教楼主一个问题：乳粉有全脂乳粉和脱脂乳粉之分，针对这两者时加入硫酸的量是不是不同啊？各自有没有确切的加入量？

主要区别在于常量法的样品及试剂用量较微量法多。我觉得主要是滴定酸的浓度比常量和半微量低吧楼主的意见呢？