【求助】求助ACE抑制活性的测定方法

嗯，师兄说那个重现性很不好，很难控制条件一致。那个盐酸是终止反应。加入盐酸后，就继续加了乙酸乙酯了，最后的盐酸都在底部啦。对反应没影响。

我师兄做过ACE抑制活性的测定：用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品，于37℃保温3min后，再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸馏水中，活力为0.1U/ml)，混匀后在37℃保温30min，再加入250μl的1.0mol/L的盐酸溶液以终止反应，再加入1.7ml醋酸乙酯，经15s振荡混匀后静置5min，用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯层，120℃烘箱烘干，加入1.0ml蒸馏水，混匀后在波长228nm处测定吸光度。在上述条件下，抑制50%的ACE活性(IC50)为样品的一个活性单位。 ACE抑制率（%）=（B-A）/A×100%式中：A为含有样品和ACE溶液的吸光度；B为不含样品，但含有ACE溶液的吸光度。

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你是哪里的朋友，我一个师兄做过，前天刚答辩完