求教关于DTNB!!
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求教关于DTNB!!!

测二硫键时,DTNB难溶于水,加热后依然难溶,请问有哪位高手做过这个实验,帮忙教一下 3 回答 ·  5 关注
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我也要做二硫键和巯基的测定,今天第一次配DTNB,是用ph8 的tris-甘氨酸直接稀释定容的,发现DTNB有少量不溶,请教了下侧过巯基的同学,他们说是把缓冲液的各种所需试剂和DTNB一起溶解溶解到离定容还剩一点体积的时候,再调节ph至8,再转移到容量瓶定容。然后我就做了个试验,把DTNB溶于少量ph8上述缓冲液,发现pH 下降的蛮厉害的,所以我猜是因为这个原因,我用ph8的tris-甘氨酸缓冲液配dtnb才没完全溶解。最后,我用适量ph8的tris-甘氨酸缓冲液悬浮DTNB,再用氢氧化钠调节pH至8,最后用ph8的tris-甘氨酸缓冲液定容。第一次配这个,好辛酸哦~文献里都不写细节,让人走好多弯路,希望我的经验在你那也适用~
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我也测过,容缓冲溶液的,2楼说的对
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我用的tris-glycine 缓冲液是0.086M TRIS 0.09M glycine, 4mM EDTA, 用盐酸调到pH8
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