酶解缓冲液及酶解过程中pH如何控制
用碱性蛋白酶酶解，该酶的最适pH为8.5，需要pH8.5的缓冲液，有如下几个问题：1)碱性缓冲液有硼酸-硼砂缓冲液，tris-盐酸缓冲液符合8.5的pH要求，这两种缓冲液都可以么？对产物的活性哪个影响小一点？2)如果要比较不同pH条件下酶解产物的活性，如pH8.5,9,9.5，前两种缓冲液可以用硼酸-硼砂缓冲液，但是该缓冲液达不到9.5的要求，那用硼砂-氢氧化钠缓冲液来配置，会有影响么？3)酶解过程中要始终保持某一pH不变，文献里说要加入1mol/L的氢氧化钠始终保持起始pH，这个如何操作？是在酶解过程中不停地测定pH么？4)酶解过程需要一直搅拌么？ 展开全部∨ 1 回答 · 5 关注共1个回答
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我之前做蛋白质酶解的时候用的也是碱性蛋白酶，不过考虑到用缓冲液酶解后脱盐也是一个很痛苦的过程，所以我的方案是就是用水溶解蛋白酶后，直接加酸或者加碱调到所需的ｐＨ，酶解过程中通过配置适当的酸溶液适时调节ｐＨ
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