MTT法测细胞活力
本人现在用MTT法做测试食用菌液体菌种活力的实验，做下来发现各种各样的问题。请教下各位前辈，跪请帮助首先有四个疑问，为什么MTT法生成的甲臜是蓝紫色结晶物质，可是检测波长却定在560或570nm（此波长下颜色是黄色和绿色），我做实验过程中产生不少黄色物质，蓝紫色物质不稳定，PS，我用异丙醇溶解MTTf。第二，产生的蓝紫色物质总是贴在塑料的离心管壁上，产生多贴得就多，我用的是可见紫外分光光度计做这个实验（实验室没有酶标仪），要取出溶解MTTF后的液体，这样造成很大的误差，要怎么才不会粘在管壁上。第三，MTT与菌体的反应温度真是让我抓狂，温度越高在560nm处测得的吸光值越高，在50摄氏度之前的温度下基本上没反应，之后温度越高产生的物质的吸光值越高。跪求能人来解达，同道中人来探讨，感谢一万次。 展开全部∨ 3 回答 · 4 关注共3个回答
-
我知道颜色问题了，这是因为吸收波长在500－600被测溶液是蓝紫色，而且用不同溶剂波长不一样（这个和文献符合，做实验也可以验证），就是很难理解。
-
生成的甲臜要溶解的，震荡一下甲臜不就不贴壁了MTT的反应是酶促反应，37度反应就好了，为什么要50以上？反应要2-4小时
-
MTT 应用PBS溶解吧用酶标仪吧，不然太不准了做过好多mtt，没感觉温度的影响，细胞都是在37度和MTT在培养箱里反应或者没看懂楼主的意图啊，请问您是做的细胞实验么还是菌体的发酵
相关问题
编辑推荐
