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如何分离玉米胚芽中SOD酶

我制取的粗酶液没有任何酶活，原因可能是酶失活或者根本没提出SOD酶，下面是我的制取方法，求前辈们指点或提出更好可行的办法。取20g玉米胚芽，用粉碎机粉碎，以液料比3:1,4:1,5:1的比例在胚芽中加入pH7.8的50mmol/L的磷酸钠缓冲液，浸提1小时，用四层纱布过滤，在10000r/min4℃下离心20min，上清液即为SOD的粗酶液，于4℃冰箱中保存，测其蛋白质含量与酶活，选出最适液料比。酶活我采用改进的邻苯三酚法（GB/T5009.171--2003）测量。我认为可能是粉碎过程酶失活，那可以加些冰屑来降温；或者浸提过程中酶根本没浸出，因为SOD属于胞内酶，那是否可用超生波破壁；或者其他什么原因。希望前辈们可以尽快给予帮助，不胜感激。补充下：测酶活，325nm下空白样邻苯三酚自氧化速率△A325≈0.060，加样液后△A′325≈0.060。多次测量均是。所以认定基本零酶活。展开全部∨ 0 回答 · 1 关注