【求助】请教荧光法测
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【求助】请教荧光法测定维生素C的问题

各位好!最近指导学生做荧光法测定果蔬中维生素C含量的实验,是按照国标方法进行的,但是每次测定得到的“标准空白”溶液的荧光强度居然比标准曲线的第一个浓度的荧光强度还要大,一直没有找到原因,请各位释疑解惑,谢谢! 7 回答 ·  4 关注
共7个回答
对了,再补充几点,实验测定得到的“样品空白”的荧光强度比“样品”的荧光要小,是正常的;不正常的是“标准空白”的荧光强度比低浓度“标准”溶液的荧光强度要大。可能是试剂的问题吗?
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第一次做 出去空白 标曲呈线性 R两个9呢 不过出去空白就不行了~ 第二次做 避光严格 结果好些 出去空白 R也有2个9了~ 所以我也认为避光要严格 而且反应时间要严格控制~
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昨天又做了一次实验,还是存在这样的问题,还请做过这个实验的虫友指点迷津。
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我是来学习的,哈哈
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你用的是酶标仪吗?酶标板是不能回收重复使用的
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会不会是硼酸-醋酸钠加少了,我们在做这个实验的时候,开始按照教材加2mL醋酸钠,也出现了这个情况(即:扣除本底后都是负值)
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最近实验做完了,如果不算标准曲线的空白溶液荧光值,其它浓度分别为2.5、5、7.5和10ug/mL的标准溶液的荧光值得到的回归曲线的线性非常好,而且回归曲线在纵轴上的截距非常接近于0。看来应该是标准空白溶液的问题了。也许和硼酸有关。
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