三氟乙酸基线漂移(L
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三氟乙酸基线漂移(LC)

流动相A 为纯水相,B相为乙腈,两相均添加了等量的三氟乙酸,检测波长为210纳米,走梯度时随着B相增加,基线往下漂移.但是按紫外吸收应该往上漂移的.我将波长改为220纳米,基线又往上漂移.已经多次试验证实,请各位大神解释原因.三氟乙酸截止波长为210纳米. 展开全部∨ 5 回答 ·  2 关注
共5个回答
TFA在低波长做梯度混合是会出现基线问题,主要是源于TFA的末端吸收在 梯度混合不均匀的情况下,特别容易放大, 如果一定要在210附近做测试,建议水中加5%乙腈,乙腈中加5%,这样会好一些,或者增加一个较大的混合器,会减少干扰
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走梯度时基线有漂移是正常的,但是选择的波长不同基线漂移方向改变可能与添加三氟乙酸有关
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在规定的低波长(210nm)检测的条件下,甲醇比乙腈的紫外吸收要大,乙腈比水的紫外吸收要大的多。随着乙腈比例的增加,水的比例的减小,流动相的背景吸收会越来越大,所以,基线应该往上漂移(在不考虑三氟乙酸影响的前提下)。
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这个问题我觉得在液相版块应该更多人能回答。转那去了。
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tfa混合的均匀度会有影响的,
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