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薄层板展开前是不是一定要在展开剂里先饱和(TLC)
谢谢yinbing的回复,我觉得如此说的梯度问题仅仅是想象及理论的推断而以,实际上到底是什么样的一个情况我也搞不很清楚,所有的薄层分析都是一个差速的迁移,理论上说这种迁移受多方面的影响,也正是你所说的是一个复杂的过程。确实是我们做TLC在乎的是其分离效果,做鉴别的多点,但是也有一些情况下是做薄层扫描的话,是不是一定就得饱和呢这当然是多做几次就知道结果了,可是谁能告诉我这预饱和半个小时的来由曾有经验就是你说的饱和跟不饱和的差别不是很大,我也曾考查了一下将展开剂倒入展开缸后大约五分钟左右将盖子揭开味道都已经很大了,所以我觉得这个饱和的说法,我的意见是,有时间饱和的话尽可能饱和,如果没有时间饱和的话,至少在你点板之前就应该把展开剂倒入缸内,在点板的同时也是一个饱和的过程,而且我觉得最重要的一点是,在把点好的板放入缸内时,一开始速度很快,但其速度应该比蒸汽慢得多,所以我至今仍有疑惑的就是您所说的“直接放进薄层板,空间的蒸汽相未达平衡,越往上面,蒸汽相浓度越稀,薄板上下位置与蒸汽相间的平衡交换是不同的,再有就是展开剂在薄板上爬行时会形成流动相分层的现象,二者势必影响影响流动相的组成,形成一个梯度。”也许这有点抠死理,但是我现在还是没有搞明白,我现在的做法仍然是事先预饱和的方法,有时也会做一下平行比较,确实没多大的差别,如果谁有这样的经验而且是做过扫描的话,望不吝赐教。谢谢……
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4 回答 · 3 关注
共4个回答
时光匆匆的小流年,食品研发
2019-08-15回答
展开板不用在展开剂里饱和的,薄层板在用前110度活化30分钟.取出放冷后直接点样即可,点样结束后放到放有展开剂的展开缸里
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时光匆匆的小流年,食品研发
2019-08-15回答
是的,而且要充分饱和,一般是半小时如果不这么做,那么层析缸中的上方空气不是展层剂饱和的,这种体系会影响上行展开的质量,边跑边干!!!
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时光匆匆的小流年,食品研发
2019-08-15回答
TO:molingli一般都不需要预饱和薄层板,而是预饱和层析缸,使流动相充满整个展开空间。预饱和薄层板和不预饱和,会影响Rf值,哪个分离效果好,要靠摸索。不预饱和层析缸,直接放进薄层板,空间的蒸汽相未达平衡,越往上面,蒸汽相浓度越稀,薄板上下位置与蒸汽相间的平衡交换是不同的,再有就是展开剂在薄板上爬行时会形成流动相分层的现象,二者势必影响影响流动相的组成,形成一个剃度。其实TLC过程本身就是个极其复杂的过程。预饱和薄层板爬行速度应该比不预饱和薄层板快些,二者相差不会太大,其实我们在意的是分离效果!你觉得薄板一放进去,一两分钟就能达饱和了吗?
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时光匆匆的小流年,食品研发
2019-08-15回答
看的出你对TLC很有见解.我也一样曾经疑惑过,到底该不该预饱和薄层板,一次做过实验,发现几乎没区别.关于是否形成剃度洗脱,这个只在理论设想.斑点迁移速度的确比蒸汽慢得多,但至少一开始的实验环境与预饱和层分缸是不同.再有不同展开剂挥发性是不同的.我做过氨基酸的TLC,这里没有扫描仪,都是通过肉眼看的.你为什么要搞的那么透彻呢?就算知道了,又何妨?我觉得经验更重要些!
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