征集真蛋白的检测技术
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征集真蛋白的检测技术(已征集18种)

正交轴逆流色谱法是新近发展起来的一种方法。具体是:以n l ( 质量分数为 1 2 . 5 %? 的P E G 8 0 o 0 ) :n l( 质量分数为2 5 %的磷酸氢二钾)=1 :1 或i n( 质量分数为 1 2 . 5 %的 P E G 8 0 0 0 ) : m ( 质量分数为3 0 % 磷酸氢二钾) =1 :1 为溶剂系统,以下相作流动相,上相 作固定相,操作时采用5 0 0 r / m i n的转速和6 0 0 ml / h的流动相流速。该方法在分离度不大 的基础上提高了进样量,适用于分离天然生物大分子。 展开全部∨ 6 回答 ·  1 关注
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原理:食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,碱化蒸馏后使氨游离,用硼酸吸收 后,用硼酸标准溶液进行滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,得到蛋白含量。使用仪器:FOSS 8400(相比原来的8100多了直接自动滴定的功能)? 检一个样的时长:250℃保持一小时,420℃保持一小时,冷却后上机检测。总计时约4.5小时。
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这个单位上就是凯氏定氮仪测定蛋白的,最初好像用的是5009上的标准,凯氏定氮仪解决了大部分问题
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微乳液毛细管电动色谱分离法 ( ME E K c)? 微乳液毛细管电动色谱分离法是在胶束电动色谱 ( ME K c)基础上发展起来的,在E K C中,分离载体为离子胶束,它由表面活性剂组成,不同的表面活性剂构成不同的胶束,因而具有不同选择性,若以水包油微乳液作为分离载体,则称之为ME E K C法,? 该法是一种新型的分离技术,目前多用于小分子中性物质的分离。
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采用化学发光方法,结合有效氮吸收装置,测定饲料中的粗蛋白质。静态注射化学发光法选用2.0×10-4mol/L的Luminol溶液,用量为2.00ml,待测液的用量为2.00ml。静态注射化学发光法简化了测试方法,缩短了时间,加标回收率为86.91%~104.60%,RSD 5%(n=5),适用于饲料生产部门的质量控制。
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天然蛋白质的严密结构在某些物理或化学因素作 用下,其特定的空间结构被破坏,从而导致理化性质 改变和生物学活性的丧失 ,称为变性 ( d e n a t u r a t i o n )。 动物肌肉富含蛋白质,加热主要是破坏蛋白质分子中的氢键 ,导致其溶解度 降低 ,粘度增加 ,结晶性破 坏 ,酶活性发生变化。根据加热过程中蛋白质的这些 变化特点,通过检测不同加热程度的热变性蛋白分子 量便可对加热终点温度得出间接推断。相关的方法有 可溶性蛋 白的 S D S — P A G E电泳 、We s t e r n — B l o t 法、蛋 白凝聚试验、特定的酶活性测定以及对指示蛋白的免 疫学检测等。综合方法的简便性、重复性和稳定性, 白质的凝胶电泳分析不失为一种有效的验证肉类加 热程度的方法。而随着新方法的完善,半自动与全自? 动的检测仪器也有了较高的商业化程度,如微流芯片 分离电泳的新产品 E x p e f i o n T M全 自动电泳系统结合相 应的蛋白芯片,可在 3 0 mi n内快速全 自动完成整个蛋 白电泳及条带分析 。
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毛细管电泳法 电泳一直是研究蛋白质的重要方法。毛细管电泳除了具备凝胶电泳的高分辨力以 外,以其快速、定量、重复性好。灵敏度高及自动化程度高等诸多优点在近几年内成为 蛋白质分离分析一项崭新且重要的技术。 其分离机理是根据被分离物质的泳动率不同而 将其分开,毛细管电泳仪就是基于这个原理而设计的自动化分离分析样品的仪器,由于 毛细管电泳刚兴起,目前主要应用的模式仍是自由溶液毛细管电泳,虽然此法具备多项 优点,但仍有不足之处。首先它不能用于制备分离,再者当样品较稀时不能象H P L C那 样进样较多体积,使样品吸附在柱上,然后洗脱下来。
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