gb5009.116里面的流动相我做的不好，我用的是15：85的乙腈比磷酸二氢纳

土霉素用的柱子好象要PH2左右的，我们曾经用一般的c18柱子做过但是没有响应，不知道是PH影响还是其他原因。请高手指教。

主要的问题在于 1)灵敏度，可以用质谱来解决，但同时有另一个问题就是质谱的基质效应，需要选一个好看内标，最好是其同位素内标。2)SPE的回收率问题，HLB效果不错，就是要注意提取液的pH，2-3回收率会好一些，再高就很差。同时样品的蛋白沉淀要完全，不然一天做不了几个样，很容易堵柱子。3)氮吹的时候注意温度，土霉素容易破坏。