用纯甲醇冲洗一段时间看看，实在不行，只有换柱子

可能柱效下降了

检查柱子前后接头，是否有死体积。

可能柱子使用久了

可能柱效降低了，有没有新的柱子，换一根上去，如果恢复正常了说明是柱子的问题，如果还是这样也有可能是流动相的原因

0.1tfa对柱子的损伤比较大，用后要完全清洗干净，另外色谱柱头不知道有没有污染，先确认流动相与样品均没有问题，然后可以用乙腈－水正向梯度反复洗脱几次，另外也可以问问厂家能不能反冲。