各位老师好，最近我做了个酵母菌的酒精耐受实验，方法是：将配好的YPD培养基分装到试管中，每只试管装10ml，再加一个杜氏管，灭菌后按照比例加入相应的无水乙醇(比如：10%的酒精含量，我就是9ml培养基中加入1ml无水乙醇)，涡旋混匀之后，将对数生长期的菌种按照5%的接种量加到试管中，再混匀。28摄氏度静置培养。这都三天了，只有一支在第48h的时候产气，但是到了72h，导管中的气体又没了，其余试管中还是没有产气。按以前的经验含有8%、10%酒精的试管在48h的时候大部分都能产气，并充满整个导管。我有些年头没做这个实验了， 不知道哪儿没对，望各位老师指导一下，谢谢