如何来鉴别并分析贯叶连翘提取物？

1 贯叶连翘提取物的鉴别

       贯叶连翘在我国民间已有2000多年的药用历史，收载于《中药大辞典》等。贯叶连翘提取物是以贯叶连翘HypericumPerforatumL.花期梢端或地上部分为原料提取的产品，商品提取物通常标化为含总金丝桃素0.3%。

                                                  图1 贯叶连翘花

      显微鉴别。粉末绿色至黄色。茎表皮细胞呈长方形，具直形连珠状垂周壁，角质层光滑，常见由2个相邻小表皮细胞构成的平列型气孔，外皮由5～6列厚角细胞组成。次生的中柱由韧皮部由密实的环细胞组成，大部分为木质化的木质部，小部分为内生韧皮部；髓在茎中已木质化和纹孔化；外皮和韧皮部中可能含有油腺。叶正面细胞为多边形，具波形或直形连珠状垂周壁；背面细胞较小，多具波形连珠状垂周壁。气孔通常为平列型，有时不规则。角质层光滑且正面较厚。叶脉表皮细胞细长，具直形细胞壁但偶有连珠状。具背腹性的单层栅栏细胞与较大油腺。叶的中脉由一个含少量木质化木质部的外韧维管束组成。叶不含草酸钙，无毛状体。花和萼片的特征与叶类似。花瓣外表面表皮细胞窄长，具薄而直的垂周壁，内表面细胞壁则呈波状。雄蕊花药的纤维层已木质化，花丝表皮带有条纹，其薄壁细胞呈细长形。花粉近球形，直径约20μm，外壁光滑，有3个气孔。子房细胞呈多边形，隐伏有油腺。种壳棕色，由六边形厚壁细胞组成。

2 贯叶连翘提取物的分析方法

2.1 USP法

       称取药材粉末10g或相当量的提取物，加甲醇100ml，振摇15分钟，滤过，滤液即为供试液。另取金丝桃苷对照品，溶解于甲醇中，配成每ml含0.5mg的对照品溶液。吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一0.5mm硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-水-冰醋酸-甲醇(10：2.6：1.1：1.1)为展开剂，展开，前沿至板长的3/4处时取出，记下溶剂前沿，于空气中挥发干溶剂。喷以1%的2-二苯基硼酸-2-氨乙基乙酯的甲醇溶液，然后立即喷以5%聚乙二醇400的乙醇溶液，晾干后于365nm波长紫外灯下检视。供试液显示几个浅橙黄色荧光斑点，其中Rf值为0.5的斑点与标准品溶液色谱相应的斑点相似;供试液的2个红色荧光点中，Rf0.85者为金丝桃素，Rf0.80者为伪金丝桃素;两个亮蓝色荧光斑点为绿原酸和新绿原酸，其位置在金丝桃苷的橙色斑点之下。

2.2 AHP法

       称取金丝桃素和伪金丝桃素两种对照品适量，分别用甲醇溶解，稀释成0.1mg/ml的溶液作为对照品溶液。取提取物0.1g，加甲醇10ml，振摇5分钟，上清液转入50ml容量瓶中，重复操作三次，定容至刻度，用0.45μm滤膜滤过作为供试品溶液。吸取以上供试液和对照液，各5μl，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-正丁醇-冰醋酸(3：6：1)为展开剂展开，晾干，薄板置紫外灯(365nm)下检视，供试品和对照品色谱相应的位置上，呈现相同的亮红色荧光斑点(金丝桃素Rf0.71，伪金丝桃素Rf0.50)。