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【求助】求助ACE抑制活性的测定方法

各位有没有做过ACE抑制活性的体外测定的,即ACE与HHL反应生成马尿酸的分光光度法测定。本人实验几次结果均不理想,现求助具体测定方法内容,越详细越好。非常感谢,祝愿大家心想事成,万事如意!
4人参与回答
,农产食品检测服务销售工程师 2019-06-07回答
嗯,师兄说那个重现性很不好,很难控制条件一致。那个盐酸是终止反应。加入盐酸后,就继续加了乙酸乙酯了,最后的盐酸都在底部啦。对反应没影响。
,采购员 2019-06-07回答
我师兄做过ACE抑制活性的测定:用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH8.3)将Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml试管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的样品,于37℃保温3min后,再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸馏水中,活力为0.1U/ml),混匀后在37℃保温30min,再加入250μl的1.0mol/L的盐酸溶液以终止反应,再加入1.7ml醋酸乙酯,经15s振荡混匀后静置5min,用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯层,120℃烘箱烘干,加入1.0ml蒸馏水,混匀后在波长228nm处测定吸光度。在上述条件下,抑制50%的ACE活性(IC50)为样品的一个活性单位。 ACE抑制率(%)=(B-A)/A×100%式中:A为含有样品和ACE溶液的吸光度;B为不含样品,但含有ACE溶液的吸光度。
,食品研发员 2019-06-07回答
希望看到此帖的同学尽快回复我,多谢了!
,食品研发工程师 2019-06-07回答
你是哪里的朋友,我一个师兄做过,前天刚答辩完
 
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