我也要做二硫键和巯基的测定，今天第一次配DTNB，是用ph8 的tris-甘氨酸直接稀释定容的，发现DTNB有少量不溶，请教了下侧过巯基的同学，他们说是把缓冲液的各种所需试剂和DTNB一起溶解溶解到离定容还剩一点体积的时候，再调节ph至8,再转移到容量瓶定容。然后我就做了个试验，把DTNB溶于少量ph8上述缓冲液，发现pH 下降的蛮厉害的，所以我猜是因为这个原因，我用ph8的tris-甘氨酸缓冲液配dtnb才没完全溶解。最后，我用适量ph8的tris-甘氨酸缓冲液悬浮DTNB，再用氢氧化钠调节pH至8，最后用ph8的tris-甘氨酸缓冲液定容。第一次配这个，好辛酸哦~文献里都不写细节，让人走好多弯路，希望我的经验在你那也适用~

我也测过，容缓冲溶液的，2楼说的对

我用的tris-glycine 缓冲液是0.086M TRIS 0.09M glycine， 4mM EDTA, 用盐酸调到pH8