我想用DEAE-Sephadex A-25的
葡聚糖凝胶
树脂,用来分离我的产品,因为第一次做,完全没有经验,有一些问题想求助下大家。关于DEAE A-25如何预处理,我在网上查过,方法如下:DEAE-Sephadex A-50(下称A-50)5克,悬于500ml蒸馏水,1小时后倾去上层细粒。按每克A-50加 0.5N NaOH 15ml的比例,将A-50浸泡于0.5N NaOH中,搅匀,静置30分钟,装入布氏漏斗(垫有2层
滤纸)中抽滤,并反复用蒸馏水抽洗至PH呈中性;再以0.5N HCl同上操作过程处理,最后以0.5N NaOH再处理一次。处理完后,将A-50浸泡于 0.1M,PH 7.4 PB中过夜。我是加水后使用磁子搅拌48小时,后面用布氏漏斗抽滤发现很难抽滤。接着用0.5N NaOH加磁子搅拌1小时,发现用布氏漏斗特别特别难抽滤!!!不知道大家用的时候有没有这个问题,是怎么处理的?是不是不可以加磁子搅拌?十分谢谢!幸福的柴门