在测定果蔬的ORAC的时候,按照文献配制试剂:FL(96nmol/L),
磷酸盐缓冲液(pH=7.4,n=0.075mol/L),AAPH(153mmol/L)。Trolox是由25mmol/L的母液稀释而成,3.13、6.25、12.5、25、50μmol/L实验步骤为:在96孔板各微孔中分别加入25μL 样品或者25μLTorlox标准品或者25μL缓冲溶液后,再加150μL的FL,在室温预孵化20min。用单道
移液器逐个在各孔中加入20μLAAPH(或者缓冲溶液)启动反应,将微孔板置于Synergy H1 全功能
酶标仪中,在37℃下以激发波长485nm、发射波长538nm进行连续测定,每2min测定一次各孔荧光强度,测定35个循环。在测定过程中,每个孔的荧光值都出现了先升高一点点才开始下降,为什么会升高啊还有添加荧光素钠的量不一样好像荧光值也会差很多,做这个都快半个月了,数据还不好,很着急呀,每次取样量太少了,不好控制呀~~~