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测定ORAC遇到的问题

在测定果蔬的ORAC的时候,按照文献配制试剂:FL(96nmol/L),磷酸盐缓冲液(pH=7.4,n=0.075mol/L),AAPH(153mmol/L)。Trolox是由25mmol/L的母液稀释而成,3.13、6.25、12.5、25、50μmol/L实验步骤为:在96孔板各微孔中分别加入25μL 样品或者25μLTorlox标准品或者25μL缓冲溶液后,再加150μL的FL,在室温预孵化20min。用单道移液器逐个在各孔中加入20μLAAPH(或者缓冲溶液)启动反应,将微孔板置于Synergy H1 全功能酶标仪中,在37℃下以激发波长485nm、发射波长538nm进行连续测定,每2min测定一次各孔荧光强度,测定35个循环。在测定过程中,每个孔的荧光值都出现了先升高一点点才开始下降,为什么会升高啊还有添加荧光素钠的量不一样好像荧光值也会差很多,做这个都快半个月了,数据还不好,很着急呀,每次取样量太少了,不好控制呀~~~
2人参与回答
,食品化验员 2019-06-07回答
楼主,你好!我需要用Synergy H1 全功能酶标仪做化学发光信号检测,具体是检测荧光素信号,但是不会用这个仪器,想请教楼主这个仪器怎么做化学发光
,食品检测销售经理 2019-06-07回答
按照文献的方法是没有错的,极有可能是因为你在加AAPH前没有进行37℃孵育
 
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