用
碱性蛋白酶酶解,该酶的最适pH为8.5,需要pH8.5的缓冲液,有如下几个问题:1)碱性缓冲液有
硼酸-
硼砂缓冲液,tris-盐酸缓冲液符合8.5的pH要求,这两种缓冲液都可以么?对产物的活性哪个影响小一点?2)如果要比较不同pH条件下酶解产物的活性,如pH8.5,9,9.5,前两种缓冲液可以用硼酸-硼砂缓冲液,但是该缓冲液达不到9.5的要求,那用硼砂-氢氧化钠缓冲液来配置,会有影响么?3)酶解过程中要始终保持某一pH不变,文献里说要加入1mol/L的氢氧化钠始终保持起始pH,这个如何操作?是在酶解过程中不停地测定pH么?4)酶解过程需要一直搅拌么?