用ph示差法测定苋菜红色素的含量，我的步骤如下：1.将苋菜烘干，磨碎，过筛，备用；2.称取1g样品，加入25ml，40%乙醇，超声波辅助提取30min，40摄氏度，200w；3.过滤，旋转蒸发，离心，得到提取液；4.取1ml提取液，分别用ph1.0和ph4.5的缓冲液定容到10ml，静置20min；5.分别在540nm（我自己扫描得到的波长）和700nm处测得吸光度值。ph1.0的缓冲液：称取1.49gkcl，用水定容到100ml，用hcl调节ph到1.0ph4.5的缓冲液：三水合乙酸钠2.99g，冰醋酸1.68g，加水至1L出现的问题：加入ph1.0缓冲液的提取液颜色比ph4.5处的浅，这样测得的吸光度值前者小于后者，根据ph示差法的经验公式，两者的差值是负值各位有碰到过这样的问题吗？求指教，非常感谢！！