本人现在用MTT法做测试
食用菌液体菌种活力的实验,做下来发现各种各样的问题。请教下各位前辈,跪请帮助首先有四个疑问,为什么MTT法生成的甲臜是蓝紫色结晶物质,可是检测波长却定在560或570nm(此波长下颜色是黄色和绿色),我做实验过程中产生不少黄色物质,蓝紫色物质不稳定,PS,我用异丙醇溶解MTTf。第二,产生的蓝紫色物质总是贴在塑料的离心管壁上,产生多贴得就多,我用的是可见
紫外分光光度计做这个实验(实验室没有
酶标仪),要取出溶解MTTF后的液体,这样造成很大的误差,要怎么才不会粘在管壁上。第三,MTT与菌体的反应温度真是让我抓狂,温度越高在560nm处测得的吸光值越高,在50摄氏度之前的温度下基本上没反应,之后温度越高产生的物质的吸光值越高。跪求能人来解达,同道中人来探讨,感谢一万次。