最近在做草莓POD的测定,用的
愈创木酚法,测出来的OD值一直不够稳定,一会上下波动,一会持续下降实验方法如下:酶提取液的制备:从5个
草莓果实上取样,称5 g去皮果肉组织,放入预冷的研钵中,加2.5 ml 0.1 mol·L-1 pH6.4磷酸缓冲液(含4% PVP),冰浴研磨,移至10 ml
离心管中,再加入2.5 ml缓冲液冲洗研钵并移至离心管,于4 ℃,10000 r·min-1冷冻离心30 min,取上清液测定。采用愈创木酚法,反应体系中加入1 mL酶粗提液,3 mL愈创木酚,0.2 mL 0.5mol/L H2O2混匀,每隔10s记录一次,扫描3 min内OD470的变化值,以每分钟470 nm处吸光值变化0.001为1个酶活力单位(U)。求大神指教,哪里出了问题