采用葡萄糖试剂盒测定RDS、SDS、RS的含量问题
我的试验方法如下:淀粉样品(1.00g,干基)悬浮于乙酸钠缓冲溶液(20mL,0.1M,pH5.2)中,向反应瓶中加入5颗玻璃珠,混合5min。样品放在沸水浴中加热30min,结束后立即放入37℃水浴中,待温度平衡后加入10mL混酶,开始振荡反应并准确计时。分别在20min和120min取0.50mL的试样与10mL的乙醇(66%,v/v)反应来结束酶反应,用GOPOD试剂盒测量淀粉的消化性。每个试样做平行试验。混和酶的制备:3g的猪胰液酶分别加入到装有20mL去离子水的离心管中,搅拌10min,然后以1500g转10min。取54mL的上清液与6mL稀释的淀粉葡糖苷酶溶液和4mL的去离子水混合。根据酶活用超纯水配置290U/mL猪胰α
淀粉酶和15U/mL糖化酶,我买的这两种酶都是粉末状的。样品中快消化淀粉( RDS ) 、慢消化淀粉( SDS ) 、抗消化淀粉( RS ) 的质量分数具体计算公式如下:RDS(%)=(G20-FG)×0.9/TSSDS(%)=(G120-G20)×0.9/TSRS(%)=[TS-(RDS+SDS)] /TS式中:G20—淀粉酶水解20 min后产生的
葡萄糖含量(mg);G120—淀粉酶水解120 min后产生的葡萄糖含量(mg);FG—酶水解处理前淀粉中游离葡萄糖含量(mg);TS—样品中总淀粉含量(mg)。测定的结果:1.快消化淀粉含量很低,10%都不到,也就是在20min时的测定量很低,这是本试验最大的问题;2.式中的TS还需要对样品测定下吗?还是就是称取的1g淀粉?我的样品是
甘薯淀粉3.FG就是在加酶前测定的葡萄糖含量?不知道哪里出了问题,请大神们指教,谢谢了
2人参与回答
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是不是我的酶有问题,我不是用的Sigma公司的,糖化酶也不是液体的
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请问一下,你用的是什么试剂盒?