最近在做ACE抑制的活性多肽研究,但是碰到一个问题,关于反应液稳定性的问题:我的实验过程是这样的:50 uL 样品+50 uL ACE溶液 孵育5 min后,再加入150 uL HHL溶液,孵育30min,然后加入250 uL 1M的
盐酸灭活,再HPLC进样,检测HA的峰面积。但是在检测的过程中发现一个问题,样品放置时并不稳定,HA的峰面积会继续增大,24 h大约会增加30%,4℃ 冰箱放置的话24 h增加10%。试过用高浓度的盐酸(1 M,2 M,3 M,6M)来灭活,但是发现浓度高的盐酸峰面积的增加量反而更大。不知道各位有没有碰到相同的情况,怎么解决的,恳请不吝赐教!