本人在做葡聚糖凝胶g25分离多肽的实验，买回来的葡聚糖凝胶热法溶胀好后自己装柱，装柱后流动相平衡过夜，层析柱规格为1.6mm*50mm，流动相在过柱前经过了0.45微米的滤膜，样品经过10000g离心5min，第一次过柱时自然流速为0.4mL/min左右，和我所需的流速差不多，但在第二次过柱的时候重新装柱，流速明显变小，且过柱过程中流速越变越小，最后几乎是半个小时都接不够3mL，这是什么原因啊，我的流动相和样品都处理过了，应该不是样品和流动相中的杂质把柱子堵了，不知道各位做葡聚糖凝胶的遇到这种情况没有啊，帮帮忙啊，怎么回事啊这是？