为了改善分析结果，某些操作需要连续改变流动相中各溶剂组分的比例以连续改变流动相的极性，使每个分析组分都有合适的容量因子k，并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离，这种洗脱方式称为梯度洗脱。梯度洗脱可在下列情形中发挥重要作用：在等度下具有较宽k值的多种样品分析。大分子样品分析。样品含有强保留的干扰物，在目标化合物出峰后设置梯度洗脱，将干扰物洗脱出来，以免其影响下一次数据采集。分析方法建立时，不知道其洗脱情况，使用梯度洗脱，找出其较优的洗脱条件。