环境内分泌干扰物的拟雌激素活性与儿童性早熟发病的关系及其中药治疗干预的研究目的：探讨环境内分泌干扰物 ( environmental endocrinedisruptors，EED) 与儿童性早熟发病的关系，制定针对EED拟雌激素作用的中药治疗方案，并深入研究中药治疗的作用机理。以上海郊区养殖池塘的水生生物为代表，检测其EED的暴露水平，作为追踪人类机体暴露于EED的来源的一种探索。 方法： (1)采用气相色谱及高效液相色谱法检测了110例性早熟患儿及性别、年龄匹配的100例正常儿童血清中数种有代表性的EEDs(包括：洗涤剂降解产物中的辛基酚(octylphenol，OP)、合成树脂原料中的双酚 A (bisphenolA，BPA)、塑料增塑剂中的邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate，DBP)及邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP)的含量，同时测定性早熟患儿靶器官的发育指标，包括子宫、卵巢的体积、血清雌二醇的水平。对两组儿童血清EED含量进行分析，并进一步将血清EED含量与靶器官的发育指标作相关性分析，以探讨EED与性早熟发病之间的关系。 (2)以三周龄的幼年雌性SD大鼠为实验对象，选取OP、BPA、DEHP为染毒物质，均设高中低剂量，连续喂饲14天；另选低剂量的OP和BPA混合喂饲14天，均于给药后24h处死，以子宫重量、子宫平滑肌厚度及子宫雌激素受体基因、蛋白表达水平作为观察指标，采用单因素方差分析方法进行统计处理，以评价这几种EED的拟雌激素活性及其剂量一效应关系，以及不同EED之间的联合增效作用。 (3)制定针对EED拟雌激素作用的中药治疗方案，治疗EED暴露水平较高的性早熟患儿，以上述生殖器官发育水平及血清雌二醇含量作为观察指标，验证该给药方案对EED拟雌激素活性的拮抗作用。并以该中药合剂治疗EED染毒动物，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time FQ-PCR)及免疫组织化学方法(immunohistochemistry，IHC)检测生殖器官雌激素受体(estrogenreceptor，ER)、芳香化酶(aromatase，AR)、胰岛素样生长因子(insulinlike growth factor-Ⅰ，IGF-Ⅰ)的基因和蛋白表达水平，采用单因素方差分析，从中药对靶器官上雌激素受体、雌激素合成酶及生长因子的调节作用的角度，探讨所用中药拮抗EED拟雌激素活性的作用机制。 (4)以三周龄的幼年雌性SD大鼠为实验对象，实验组喂饲BPA，干预组喂饲中药合剂 BPA，于喂饲后0.5h、1h、1.5h、4h、8h、24h、48h、72h、96h的每个时间点，每组处死6只，测定血清BPA的含量，采用Gauss-Neuton法分析中药干预对BPA在实验动物体内吸收、分布及消除过程的影响，从中药对EED在机体内的代谢动力学的影响角度，探讨其作用机制。 (5)对采集自上海十个郊县120个养殖池塘的水生生物(鱼、虾、蟹)标本，以高效液相色谱法，检测其中几种有代表性的EED(有机氯农药DDT的代谢产物中的二氯二苯二氯乙烯(1，1-dichloro-2，2，bis(p-chlorophenyl)ethyene，p-p-DDE)、洗涤剂降解产物中的壬基酚(4-nonylphenol，4-NP)及塑料增塑剂中的邻苯二甲酸乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP)在其肌肉组织中的含量，以对我们日常所摄食的水生生物暴露于EED的种类及其严重程度作出较为确切的评估。 结果： (1)部分正常儿童血清中检测到一定含量的OP、BPA、DBP及DEHP(ND～7.42μg/l，ND～6.24μg/l，ND～0.94 μ/l，ND～0.97μg/l)，性早熟患儿血清中 OP 含量(ND～4.52μg/l)、BPA含量(ND～35.18μg/l)、DBP含量(ND～15.60μg/l) 及DEHP含量(ND～17.53μg/l) 均显著高于正常儿童 (P的性早熟患儿的百分比也显著高于正常儿童(P暴露水平较高的性早熟患儿经中药治疗三个月后，乳腺组织显著消退、子宫卵巢体积显著回缩，血清E水平显著下降(均 P含量的检测结果显示，若从EED污染的种类及程度来看，以p-p-DDE的污染最为广泛，程度也较重，4-NP污染其次，DEHP的污染相对较少、程度也较轻；而从EED污染的地域来看，杭州湾地区(南汇、奉贤、金山)及近郊城市化地区(闵行、嘉定、宝山、浦东)以p-p-DDE污染范围相对较广，污染程度也相对较重(分别为56.9％及50％的采样点p-p-DDE重度污染)；内陆水域地区(松江、青浦)及海岛地区(崇明)则以4-NP污染范围相对较广、污染程度相对较重(分别为43.3％及38.7％的采样点4-NP中～重度污染)。 结论： (1)当前的正常儿童已有相当一部分暴露于EEDs。 (2)性早熟患儿EEDs 的暴露程度比正常儿童严重得多，并与靶器官的病变程度呈统计学显著正相关，因此推测EEDs与性早熟的发病密切相关，是其重要的致病因素之一。 (3)染毒动物实验进一步证实了EED的拟雌激素活性及其量效关系，并证实不同种类的EED之间具有联合增效作用。 (4)制定了针对EED拟雌激素作用的中药治疗方案，并通过临床及动物实验验证了该中药治疗方案能够显著地拮抗EED的拟雌激素活性。 (5)所用中药能够显著下调靶器官雌激素受体、雌激素合成酶(芳香化酶)及胰岛素样生长因子的基因、蛋白表达水平，这可能是其拮抗EED拟雌激素活性的主要机制之一。 (6)中药浓缩合剂能显著干扰消化道对BPA的吸收，使其吸收速度减慢，吸收总量明显减少，这可能也是中药拮抗EED毒性的机制之一。 (7)上海郊县养殖池塘的水生生物已较普遍地受到EED的污染，摄食污染的水生生物是人体暴露于EED的一个重要途径。