多糖DEAE52分离纯化 不同梯度的盐洗出来可能是同一种物质么?
求助,各位大神可以帮忙看看吗?用DEAE-52 分离多
糖,分别用去离子水、0.05Nacl, 0.1NaCl, 0.2NaCl, 0.3NaCl, 0.5NaCl 洗脱,收集并冻干后用GPC测分子量,感觉出峰时间和位置都差不多,除了水以外,5个梯度NaCl 提出来的东西峰形十分相似, 这是没有提出来嘛? 参考了DEAE-52的分离原理,是阴离子交换,按道理来讲不同梯度的
盐氯离子交换程度应该是不同的,洗脱下来应该不是同一种物质呀,又可能只是分子量相近但是不是同一种物质吗?谢谢!!
3人参与回答
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原理是这样,但是有一个前提,那就是上样量合适,而且洗脱比较充分。如果是上样量大,每一个梯度洗脱不充分,那出现交叉,重叠的峰是很可能的。
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首先测原样品有几个峰。再测分馏出来的分子量和含糖量是不是一致,如果不一致,就不是同一个样品。
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多糖过完柱子损失多么?我的只得到了差不多十分之一的上样量样品