淫羊藿提取物以淫羊藿Epimedium brevicornum等的干燥的茎叶为原料加工而成的产品,商品提取物规格较多,通常以淫羊藿苷或总黄酮为标化指标。小檗科淫羊藿属植物全世界约有30种,我国有20种,除朝鲜淫羊藿在朝鲜北部有分布之外,其它均为我国特有种。我国淫羊藿产地较多,主产于陕西、山西、甘肃、安徽、湖南、湖北等地。淫羊藿茎圆柱形,长约20厘米,表面黄绿色或淡黄色,具光泽。茎生叶对生,二回三出复叶;小叶片卵圆形,长3~8厘米,宽2~6厘米;先端微尖,顶生小叶基部心形,两侧小叶较小;偏心形,外侧较大,呈耳形,边缘具黄色刺毛状细锯齿;上表面黄绿色,下表面灰绿色,主脉7~9条,基部有稀疏细长毛,细脉两成突起,网脉明显;小叶柄长1~5厘米。叶片近革质。无臭,味微苦。
图1 淫羊藿
1 淫羊藿提取物的制造方法
取淫羊藿药材,拣去杂质,洗净,沥干余水,叶片切成丝片,茎(和根)切成2cm左右长段。将淫羊藿加适量乙醇,回流提取,分取提取液,滤过,离心,收集离心液回收乙醇。喷雾干燥即得。
本法制备的产品含淫羊藿苷约5%,适合于淫羊藿提取物(5%)的生产。
2 淫羊藿提取物的分析方法
2.1 薄层鉴别方法
取淫羊藿药材粉末0.5g或提取物适量,加乙醇10ml,温浸30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,即为供试品溶液。称取淫羊藿苷对照品,用甲醇溶解并稀释成0.1mg/ml,即为对照品溶液。吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl,分别点于同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上,以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10:1:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(365nm)检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同的暗红色斑点;喷以三氯化铝试液,再置紫外灯(365nm)检视,显相同的橙红色荧光斑点。
2.2 分光光度法
测定淫羊藿及其提取物中总黄酮的含量精密称取对照品淫羊藿苷,用甲醇配成10ug/ml的标准溶液。精密的称取本品粉末适量(相当于约含淫羊藿苷1mg),用甲醇25ml超声30分钟,定容于50ml的量瓶中,用0.45μm的微孔滤膜过滤,即为供试品溶液。分别取供试液和对照品溶液,以试剂为空白,在270nm波长处测定吸收度,计算即得。
3.3 HPLC法测定淫羊藿及其提取物中淫羊藿苷的含量
色谱条件与系统适用性试验:ODS25uC18(4mm×150mm)色谱柱;
流动相:乙腈-水(30:70);
检测波长:270nm;流速:0.8ml/min。理论塔板数以淫羊藿苷计不小于1500。
对照品溶液的制备:精密称取对照品淫羊藿苷,用甲醇配成0.1mg/ml的溶液。
供试品溶液的制备:精密的称取本品粉末适量(相当于约含淫羊藿苷1mg),用甲醇25ml超声30分钟,定容于50ml的量瓶中,用0.45μm的微孔滤膜过滤,即为供试品溶液。
测定法:将样品供试液、对照品溶液各10μl分别注入HPLC仪,面积外标法计算。