琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不宜高于5V/cm。
电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃进行电泳。
菠萝蛋白酶主要来源于植物茎中,故也称为茎菠萝蛋白酶。菠萝蛋白酶的主要成分是一种含巯基的蛋白酶,同时还包含过氧化物酶、酸性磷酸酯酶、几种蛋白抑制剂和有机活性钙,其活性中心为巯基,能进行各种蛋白质水解,进行生化反应,可广泛应用于食品、医药及生物等行业。
在医药工业中,由于它能在生物体内溶解纤维蛋白和血凝块,因此可以治疗水肿及多种炎症,并且能迅速溶痂,对正常组织无害,不影响植皮,适用于中小面积深度烧伤的治疗等。
菠萝蛋白酶在人体临床上的应用
菠萝蛋白酶作为药物,日前大多情况下均是通过同其他物质按一定配比使用而实现临床上最佳的治疗效果。扑尔敏是一类抗过敏药物,当其同菠萝蛋白酶混合使用时,能起到很好的抗炎效果,可防止因组织胺所引起的毛细血管通透性增高;有研究者针对男性慢性前列腺炎,采用抗生素加用菠萝蛋白酶肠溶片的治疗方法,其疗效明显优于单用抗生素,这是菠萝蛋白酶能改变促进不同药物渗透到组织和器官中,增加血和尿中抗生素水平,从而使抗生素易于达到感染部位的结果。
市售的复方菠萝蛋白酶成分主要为菠萝蛋白酶和猪胆汁膏,菠萝蛋白酶的巯基可使纤维蛋白大分子链断裂而使物质的粘性降低,猪胆汁膏具有清热解毒利湿等功效,该药主要用于化痰止咳,必能起到良好的效果;另外,菠萝蛋白酶同施坦宁联合使用时,能增强其对小儿肺炎的治疗效果,这都与其蛋白水解的功能密切相关。
除此之外,菠萝蛋白酶还能在一定程度上调控肿瘤细胞的基因表达,促进其诱导分化,为肿瘤治疗提供了一种新的思路与方法。后经研究证实确有其效。
柑橘果胶(简称:CP)主要从橘、柑、柠檬、甜橙、柚等栽培类型的果皮中提取(含量约25%)的植物多糖胶。柑橘果胶作为一种健康营养的补充剂,在生物医学中也得到广泛应用,如在生物医学应用研究方面,柑橘果胶已被广泛用于靶向药物输送和其他潜在的生物医学应用研究,用作解毒剂、医用黏合剂、镇痛剂等。因此,柑橘果胶制剂作为一种新型生物材料在医学研究中具有巨大的应用前景。
柑橘果胶水凝胶及其应用
水凝胶是具有吸收和锁住大量水分、生理溶液、盐溶液等的三维交联聚合物材料。目前,具有超强吸附能力并可生物降解的水凝胶已有研究报道,如聚氨基酸和羧甲基纤维素等聚合物材料。果胶在酸性和高温条件下较稳定,在二价阳离子存在时可形成水凝胶,用于输送生物活性物质,是一种理想的药物传递系统。水凝胶因其水分含量高、黏弹性好、扩散传输等特性与细胞外基质相似,可减少环境对组织的刺激,因此可用于人造皮肤和组织工程学。此外,水凝胶还可用于药物控释基质、隐形眼镜、蛋白质分离等。
Birch等以柑橘果胶和壳聚糖制备的水凝胶具有优良的渗出物吸收能力,是做伤口绷带的理想材料。该研究探讨了温度、酸和盐对凝胶体系的影响。结果表明,低温会增加凝胶强度,pH与凝胶的膨胀性能有关。无酸的凝胶体系干燥后与人体骨髓干细胞具有良好的生物相容性,无盐可使柑橘果胶;和壳聚糖更容易形成厚的聚合电解质凝胶。
Jung等以不同的柑橘果胶和果胶甲酯酶修饰后的柑橘果胶制备凝胶珠包封消炎痛,消炎痛和氯化钙的浓度对包封率有显蓍影响,模拟胃肠消化结果表明改性柑橘果胶可提高药物的包封率和结肠靶向性。
Borisenkov等切制备了3种能中断肠肝循环雌激素的柑橘果胶凝胶粒子,分别为单独的柑橘果胶凝胶粒子、柑橘果胶/小麦木质素凝胶粒子和柑橘果胶/橡木木质素凝胶粒子。该研究结果表明,具有光滑表面的柑橘果胶凝胶粒子能主动吸附微生物β-葡萄糖醛酸苷酶和适度吸附雌激素,柑橘果胶/小麦木质素凝胶粒子表面不规则且具有中度吸附雌激素的能力,而柑橘果胶/橡木木质素凝胶粒子对雌激素具有高度亲和力。此外,柑橘果胶凝胶在药物片剂形成过程中可作为黏合剂促进片剂形成并对药物起到控释作用啊。